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    ELISA試劑盒實驗前應(yīng)嚴格要求

    發(fā)布時間: 2014-06-06  點擊次數(shù): 906次

        ELISA試劑盒的操作因固相載體的形成不同而有所差異,國內(nèi)醫(yī)學(xué)檢驗一般均用板式點。    本文將敘述板式ELISA各個操作步驟的注意要點,ELISA檢測試劑盒珠式、管式及磁性球ELSIA,國外試劑均與特殊儀器配合應(yīng)用。

       可用作ELISA試劑盒測定的標(biāo)本十分廣泛,體液(如血清 )、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、糞便)等均可作標(biāo)本以測定其中某種抗體 或抗原成份。有些標(biāo)本可直接進行測定(如血清 、尿液),有些則需經(jīng)預(yù)處理(如糞便和某些分泌物)。這些標(biāo)本收集的時間、方法和保存都有一定的要求。
       按試劑盒說明書的要求準(zhǔn)備實驗中需用的試劑。ELISA中用的蒸餾 水或去離子水,包括用于洗滌的,應(yīng)為新鮮的和高質(zhì)量的。自配的緩沖液應(yīng)用pH計測量較正。從冰箱中取出的試驗用試劑應(yīng)待溫度與室溫平衡后使用。試劑盒中本次試驗不需用的部分應(yīng)及時放回冰箱保存。
       ELISA試劑盒的配制:對于每種細胞因子應(yīng)仔細閱讀說明書,注意每批的細節(jié)。在使用細胞因子前,瞬時離心試劑瓶,盡可能多地收回其中的細胞因子。根據(jù)每批說明書中的細節(jié),將凍干的細胞因子復(fù)溶。 一般待測抗原標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性范圍的可通過將標(biāo)準(zhǔn)品做8次2倍系列稀釋從2000pg/ml到15pg/ml??衫脴?biāo)準(zhǔn)的ELISA操作流程、放大試劑盒、第三類試劑、或改變酶底物系統(tǒng)可在一定范圍內(nèi)提高靈敏度。為了優(yōu)化靈敏度,建議孵育標(biāo)準(zhǔn)品和標(biāo)本。若使用過氧化物酶作為顯色系統(tǒng),應(yīng)嚴禁在洗液和稀釋液中加疊氮鈉,疊氮鈉可抑制過氧化物ELISA試劑盒酶的活性。

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